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小鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1(UGT1A1)ELISA試劑盒技術(shù)說明書
BS-2682小鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1(UGT1A1)ELISA試劑盒
實驗原理
本試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA技術(shù)，通過預(yù)包被小鼠UGT1A1單抗的微孔板捕獲樣本中的目標(biāo)抗原，再與HRP標(biāo)記的二抗形成復(fù)合物。經(jīng)TMB底物顯色后，450nm波長下測定吸光度(OD值)，其與UGT1A1濃度呈正相關(guān)^^1^^。
試劑盒組成
核心組件：
預(yù)包被微孔板(96孔，12條×8孔)
UGT1A1標(biāo)準(zhǔn)品(78-5000pg/ml梯度濃度)
HRP標(biāo)記檢測抗體、顯色劑(TMB)、終止液
濃縮洗滌液(需30倍稀釋)
輔助材料：樣本稀釋液、封板膜、密封袋等。
操作步驟
樣本處理：
血清/血漿：3000rpm離心10分鐘，避免溶血;若需保存，-20℃分裝防反復(fù)凍融。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：
原倍標(biāo)準(zhǔn)品(5000pg/ml)按2倍梯度稀釋至5個濃度點。
加樣與孵育：
每孔加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μl，37℃孵育30分鐘;
洗滌5次后加入HRP抗體，重復(fù)孵育。
顯色與測定：
加入TMB避光顯色15分鐘，終止液終止反應(yīng)后讀取OD值。
注意事項
樣本要求：避免NaN3(抑制HRP活性)，溶血樣本需重新采集。
操作規(guī)范：
加樣時避免觸碰孔壁，顯色前搖勻試劑;
超范圍樣本需用稀釋液調(diào)整后復(fù)測。
保存條件：試劑盒2-8℃避光保存，使用前室溫平衡20分鐘。
數(shù)據(jù)計算
通過標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合樣本OD值，乘以稀釋倍數(shù)(若有)得實際濃度。
注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
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