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以下是雞β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒的實驗說明書核心內(nèi)容整理：
BS-4389 雞β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒
一、檢測原理
采用雙抗體夾心法，通過預(yù)包被的雞IFN-β抗體捕獲樣本中的目標蛋白，再與HRP標記的檢測抗體結(jié)合形成復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色系統(tǒng)反應(yīng)后，450nm波長下測定OD值，顏色深度與IFN-β濃度成正比。
二、試劑盒組成
預(yù)包被微孔板?：96孔或48孔規(guī)格(抗雞IFN-β抗體包被)
標準品?：6濃度梯度(常見范圍：25-800pg/mL或15.625-1000pg/mL)
酶標抗體?：HRP標記的檢測抗體
顯色系統(tǒng)?：TMB底物A/B液
終止液?：2M硫酸溶液
濃縮洗滌液?：20×或30×需稀釋使用
三、樣本處理要求
血清/血漿?：3000rpm離心10-30分鐘，避免溶血
細胞培養(yǎng)上清?：直接離心去除顆粒物
組織勻漿?：按重量比加入PBS勻漿后離心取上清
保存條件?：-20℃分裝，避免反復(fù)凍融
四、操作步驟
平衡試劑?：所有組分室溫平衡20-30分鐘
加樣?：標準品/樣本按50-100μL/孔加入
孵育?：37℃反應(yīng)30-60分鐘，洗滌3-5次
顯色?：加入TMB避光反應(yīng)10-15分鐘
終止與檢測?：加終止液后立即測定450nm OD值
五、關(guān)鍵參數(shù)
檢測范圍?：2-48ng/L或15.625-1000pg/mL(不同品牌有差異)
靈敏度?：檢測限5.7pg/mL
精密度?：板內(nèi)/板間變異系數(shù)<10%
有效期?：6-12個月(2-8℃保存)
六、注意事項
不同批次試劑不可混用
顯色時間需嚴格控制，強光會干擾結(jié)果
加樣需保持速度一致，避免孔間時間差過大
酶標板開封后需密封防潮保存
完整操作請以試劑盒內(nèi)附說明書為準，部分品牌提供免費代測服務(wù)。
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