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如何正確使用ELISA板進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?
以下是ELISA板正確使用的實(shí)驗(yàn)指南，本生結(jié)合關(guān)鍵操作要點(diǎn)和常見(jiàn)問(wèn)題解決方案：
一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
板選擇與處理?
優(yōu)先選用聚苯乙烯材質(zhì)96孔板(吸附性能均衡)，新板需用去離子水沖洗去除雜質(zhì)?
包前用碳酸鹽緩沖液(pH 9.6)平衡，避免溫差導(dǎo)致板變形
試劑配制?
標(biāo)準(zhǔn)品需現(xiàn)配現(xiàn)用，凍存樣本避免反復(fù)凍融(建議分裝保存)
封閉液推薦5% BSA-PBST(含0.05%吐溫20)，37℃預(yù)溫30分鐘
二、核心操作步驟
包被與封閉?
抗原/抗體包被濃度1-10 μg/mL，100μL/孔，4℃過(guò)夜或37℃ 2小時(shí)?
封閉液需覆蓋孔底，37℃孵育1小時(shí)，拍干時(shí)避免殘留液體
加樣與孵育?
樣本與標(biāo)準(zhǔn)品同步加樣，避免邊緣效應(yīng)(邊緣孔可加PBS緩沖)
37℃孵育時(shí)用保鮮膜封板，每10分鐘輕震混勻一次
三、關(guān)鍵質(zhì)控點(diǎn)
洗滌規(guī)范?
手工洗板需拍干后立即加洗滌液，機(jī)器洗板需檢查針頭通暢性
洗滌次數(shù)3-5次，最后一次拍干后30秒內(nèi)加下一試劑
顯色控制?
TMB避光孵育時(shí)間需預(yù)實(shí)驗(yàn)確定(通常10-20分鐘)
終止液加入后15分鐘內(nèi)讀數(shù)，雙波長(zhǎng)檢測(cè)(450/630nm)
四、常見(jiàn)問(wèn)題處理
高背景?：增加洗滌次數(shù)至5次，或更換封閉液為5%脫脂奶粉?
板間差異?：同一實(shí)驗(yàn)使用同一批次板，加樣時(shí)使用多通道移液器
注：具體參數(shù)需根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)調(diào)整，建議每板設(shè)置陰陽(yáng)性對(duì)照及標(biāo)準(zhǔn)曲線(R2>0.99)。
注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢(xún)技術(shù)老師。
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)，本生，您信任的合作伙伴!
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